1

动物细胞培养实验器材的准备

专业

验证

橡胶、玻璃、耗材等材料的酸洗、碱洗、水洗、包装，高温湿热灭菌，烘干，储藏备用。

3

生技、行知生技

2

杂交瘤抗体制备录像观看

专业

验证

完整观看杂交瘤细胞的制备过程

3

生技、行知生技

3

细胞培养的培养基配制

专业

验证

培养器材的消毒

3

生技、行知生技

4

动物细胞原代培养技术

专业

综合

将小鼠肝脏预处理后，培养箱中静置2~4小时，然后将瓶轻轻翻转，继续静止培养。2-3天后在显微镜下检查，待多数组织块的生长晕相接时，可进行传代培养。

6

生技、行知生技

5

脾细胞提取制备及计数

专业

综合

免疫后的小鼠断颈处死，剪取脾脏，制备细胞悬液细胞计数板计数。

3

生技、行知生技

6

动物细胞的传代培养

专业

综合

取出细胞系Hela，消化，离心，去上清液，加1ml培养液，取出细胞放入细胞培养瓶中入培养箱培养，1-2天后观察。

3

生技、行知生技

7

细胞株的复苏及培养

专业

综合

从低温中取出细胞株，放入37℃水浴中，取出细胞放入细胞培养瓶中，入培养箱培养，1-2天后观察。

3

生技、行知生技

8

细胞株的传代培养

专业

综合

观察培养细胞瓶中Hela达到完整汇合度，从培养瓶中、0.25%胰酶消化取出细胞系Hela，离心，细胞计数后制作生长曲线。

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9

MTT细胞活力测定

专业

综合

实验及对照细胞系的培养准备，计数；MTT标准曲线及样品细胞的测定，实验数据的分析。

3

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10

细胞的冻存实验

专业

综合

冻存细胞系的冻存前计数，按照10x8每瓶冻存管冻存，冻存液准备。

3

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11

培养细胞的观察

专业

综合

原代培养细胞、Hela传代细胞、冻存复苏细胞的培养观察，倒置显微镜下观察汇合度，3天一次，及时换液，记录生长情况。

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