《基因工程》课程实验教学大纲
一、课程概况（Course Overview）
课程名称：基因工程实验
Course： Gene engineering experiment
课程编号： 0081800010 适用学生: 大三学生
Course Number： 0081800010 Designed for:Junior
学分： 1 学时：3 独立设课：是
Credit： 1 Class hour: 3 Independent course：yes
预修课程：
生物化学实验，遗传学实验，微生物学实验
Microbiology Experiment, Biochemistry Experiment, Genetics Experiment
二、课程简介 （Course Descriptions）
本实验课程是以DNA重组技术为主线，强调实验方法的经典性、实用性。实验内容涉及了基因工程的主要过程。以含有表达载体质粒和目的片段的宿主菌为出发菌株, 经碱法抽提得到质粒DNA，对其进行浓度及纯度的测定后，用限制性内切酶进行切割，回收供体和载体片断，将载体与供体连接，然后进行转化得到重组子，以PCR方法鉴定重组子。然后将重组质粒转入表达菌株中进行诱导表达，最后以SDS-PAGE的方法对产物进行鉴定。
整个实验基本上是一个连续的过程，通过学习，要求学生能在原有的相关理论知识基础上，较全面和深入理解基因工程原理、基本掌握基因工程常用的实验方法，以求为以后的学习和科研工作打下良好和扎实的基础。
The course focus on the DNA recombine technology and emphasize on the classic and practicability. The content including the process of gene engineering.From extract the plasmid DNA and mensurate the thickness and purity of it, then cut by enzyme, recycle the objective DNA and joint them. Transport the recombined plasmid DNA to E.coli.Identify them by PCR. Induced expression the recombined plasmid and indentity the production by SDS-PAGE.
The course is a successively experiment and required the students master the theory and technology about gene engineering.That benefit the future study for students.
三、实验项目一览表(Experiment project schedule)
序号 No. | 实验名称 Name | 每组人数 Members of each group | 实验 时数 Hours | 实验类型 验证∕综合∕设计 Course Type Verifying/Synthetic/Designing | 必做∕选做 Required Course /Elective Course |
1 | 质粒DNA的提取和纯化 | 2-3 | 3 | 验证/ Verifying | 必做/ Required Course |
2 | DNA琼脂糖凝胶电泳和紫外检测 | 2-3 | 3 | 验证/ Verifying | 必做/ Required Course |
3 | 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 2-3 | 3 | 验证/ Verifying | 必做/ Required Course |
4 | 质粒DNA转化感受态大肠杆菌 | 2-3 | 3 | 验证/ Verifying | 必做/ Required Course |
5 | PCR技术 | 2-3 | 3 | 验证/ Verifying | 必做/ Required Course |
6 | DNA的酶切和目的片断的回收 | 2-3 | 3 | 验证/ Verifying | 必做/ Required Course |
7 | 真核基因在原核细胞中的表达 | 2-3 | 6 | 验证/ Verifying | 必做/ Required Course |
8 | SDS－聚丙烯酰氨凝胶电泳 | 2-3 | 6 | 验证/ Verifying | 必做/ Required Course |
9 | RACE扩增 | 2-3 | 6 | 综合∕Synthetic | 选做/ Elective Course |
10 | DNA的分子杂交Sourthern-blot | 2-3 | 6 | 综合∕Synthetic | 选做/ Elective Course |
四、推荐教材及参考书目(Recommended Teaching Materials and Reference Books)
1.推荐教材
Recommended Teaching Materials:
《基因工程实验技术》陈宏 中国农业出版社
2.参考书目
Reference Books
《分子生物学实验技术》，郝福英等编著，北京大学出版社，1998
《分子克隆实验指南（第三版）》，J.萨姆布鲁克 D.W.拉塞尔著，黄培堂等译, 科学出版社，2002
《基因工程原理与技术》，王关林，方宏筠主编，科学出版社，1998
五、考核与评价方式(Course Evaluation)
实验报告必须包括：①实验原理；②实验内容；③主要仪器和试剂；④方法和结果；⑤结果讨论。
实验考核内容及评分方法：①实验态度（15分）；②实验内容相关知识掌握程度（15分）；③实验操作熟练程度（15分）；④实验报告内容（15分）；⑤综合考试（40分）。